白文順¹  孫偉²   李書軍^2* 

（1 云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院  云南 昆明  650201

2 合肥雅萊生物工程有限公司  230000）

摘要：對(duì)山東、遼寧和安徽等地奶牛場進(jìn)行乳房炎CMT檢測，無菌收集患乳房炎的奶樣，分離致病菌，選擇致病力和理化性質(zhì)最為典型的菌株作為抗原免疫蛋雞，運(yùn)用分子篩過濾卵黃液，獲得濃度、純度均較高的IgY抗體，商品名為愛乳寶。臨床試驗(yàn)表明，愛乳寶對(duì)臨床型乳房炎治愈率為76.5%，有效率為89.5%；對(duì)隱性乳房炎，頭轉(zhuǎn)陰率為87.9%，乳區(qū)轉(zhuǎn)陰率為90.7%。

關(guān)鍵詞：愛乳寶，IgY抗體，乳房炎

奶牛乳房炎是對(duì)奶牛生產(chǎn)危害性較大的疾病之一。有關(guān)資料表明，我國部分地區(qū)奶牛臨床型乳房炎的發(fā)病率在5.38%～36%^[1]，造成奶牛產(chǎn)奶量下降，病乳廢棄，嚴(yán)重者可發(fā)生乳區(qū)化膿、壞炭疽、萎縮，致使奶牛永久喪失泌乳能力，使奶牛過早失去利用價(jià)值而被淘汰，其淘汰率占奶�？偺蕴�率的9%～11%；隱性乳房炎在奶牛群中更為普遍，研究表明，不同程度的隱性乳房炎導(dǎo)致奶牛潛在奶產(chǎn)量損失在2.8～45.5%[2]。目前，乳房炎的治療多采用抗生素及抗菌類化學(xué)藥物，往往導(dǎo)致抗藥性產(chǎn)生和藥物殘留及抗生素奶，嚴(yán)重地影響鮮奶品質(zhì)和收購，造成很大的經(jīng)濟(jì)損失。針對(duì)上述問題，合肥雅萊生物工程有限公司研制出便于用藥、適用奶牛乳房炎防治的新型、高效制劑—愛乳寶IgY抗體，它克服了常規(guī)抗生素、抗菌類化學(xué)藥物制劑在應(yīng)用中存在的局限性。該試驗(yàn)在前期試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過擴(kuò)大試驗(yàn)規(guī)模，進(jìn)一步評(píng)價(jià)和確定愛乳寶IgY抗體對(duì)奶牛臨床型乳房炎及隱性乳房炎的臨床效果，以期為今后新制劑的臨床應(yīng)用提供依據(jù)。

1.1　材料

1.1.1　實(shí)驗(yàn)藥品：愛乳寶IgY抗體（批號(hào)2768250，合肥雅萊生物工程有限公司研制）。

1.1.2  試驗(yàn)動(dòng)物：從山東省、遼寧省和安徽省3個(gè)地區(qū)的奶牛養(yǎng)殖公司共9家奶牛場飼養(yǎng)的荷斯坦牛群中 ，選取420頭年齡3~6歲，胎次2~4胎，經(jīng)臨床診斷和CMT檢查確診為臨床型乳房炎和隱性乳房炎的奶牛，其中，臨床型患牛162頭，隱性型患牛258頭。

1.2  方法

1.2.1 臨床型乳房炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；按病情分為輕度和重度兩種類型。

輕度：乳汁中有絮片、凝塊，有時(shí)乳汁呈水樣；乳房輕度發(fā)熱和疼痛或不發(fā)熱不痛，腫脹。

重度：患病乳區(qū)腫脹、熱、硬、痛。乳汁異常，分泌減少，出現(xiàn)體溫高、病牛抑郁、食欲減退等全身癥狀。

1.2.2 分組與處理：將3個(gè)地區(qū)的奶牛養(yǎng)殖公司不同時(shí)期發(fā)生的不同程度臨床型乳房炎患牛162頭，按輕度和重度進(jìn)行統(tǒng)一歸類、分組和登記；通過CMT檢測為陽性的258頭牛，不分陽性強(qiáng)弱程度均按陽性處理，然后分別按20ml/乳區(qū)的劑量連用三天，觀察試驗(yàn)結(jié)果。

1.2.3 試驗(yàn)投藥方案：愛乳寶IgY抗體均采取乳室內(nèi)推注方法給藥。所有患牛給藥前應(yīng)將乳室內(nèi)乳汁擠干凈，然后按推薦劑量于患牛乳室內(nèi)一次性推注藥物20ml，同時(shí)進(jìn)行乳房按摩數(shù)分鐘，使藥物充分分散。每日一次，連續(xù)用藥3d為一個(gè)療程。然后每天觀察和記錄患牛乳房的局部和全身反應(yīng)和變化，觀察7d。

1.2.4  療效判定標(biāo)準(zhǔn)

1.2.4.1 觀擦指標(biāo)

乳房局部觀察：乳房大小、硬度、局部溫度、腫脹和疼痛反應(yīng)等。

全身反應(yīng)觀察：體溫、呼吸數(shù)、反芻、食欲、鼻鏡和精神狀態(tài)等，觀察給藥期間及給藥后有無局部刺激性反應(yīng)及局部或全身性過敏反應(yīng)，記錄反應(yīng)開始時(shí)間，持續(xù)時(shí)間，程度，處理過程及轉(zhuǎn)歸等。

乳汁狀態(tài)觀察：乳汁顏色，粘稠度，有否凝塊，血絲等異形物，產(chǎn)量變化等。

1.2.4.2 臨床型療效判定：治療一個(gè)療程后，根據(jù)臨床癥狀和乳汁狀態(tài)的改變進(jìn)行療效判斷。

對(duì)治療效果按痊愈，好轉(zhuǎn)，無效三級(jí)評(píng)定^[3]。

痊愈：全身癥狀消失，產(chǎn)奶量恢復(fù)，乳房、乳汁恢復(fù)正常

好轉(zhuǎn)：全身癥狀消失，乳房、乳汁狀態(tài)好轉(zhuǎn)或基本消失，產(chǎn)奶量有所回升。

無效：全身癥狀未見改善，乳房乳汁癥狀未改善或變化。

按下面公式計(jì)算有效率：

有效率=痊愈數(shù)+好轉(zhuǎn)數(shù)/總病例數(shù)*100%

1.2.4.3 隱性乳房炎療效判定：根據(jù)診斷標(biāo)準(zhǔn)，確定用藥前后陽性程度的轉(zhuǎn)化情況，以轉(zhuǎn)陰率判定藥物的療效。計(jì)算公式為：

頭轉(zhuǎn)陰率（%）=給藥前陽性總頭數(shù)-給藥后陽性總頭數(shù)/給藥前陽性總頭數(shù)*100%

乳區(qū)轉(zhuǎn)陰率（%）=給藥前陽性乳區(qū)總數(shù)-給藥后陽性總頭數(shù)/給藥前陽性乳區(qū)總數(shù)*100%

1.2.4.4數(shù)據(jù)整理與統(tǒng)計(jì)分析：對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行x²檢驗(yàn)，分析實(shí)驗(yàn)藥物相同處理對(duì)不同程度臨床型乳房炎及隱性乳房炎的有效性及不同程度乳房炎對(duì)療效的影響。

該試驗(yàn)在2012年6月～2012年8月，整個(gè)試驗(yàn)周期為90天。

3.1 實(shí)驗(yàn)藥物對(duì)奶牛的安全性

所有經(jīng)愛乳寶IgY抗體治療的病例，均未觀察到全身及局部刺激性過敏。

3.2 對(duì)愛乳寶IgY抗體奶牛臨床性乳房炎的治療效果

3.2.1 愛乳寶IgY抗體對(duì)不同程度的臨床性乳房炎治療效果：愛乳寶IgY抗體對(duì)不同程度的臨床性乳房炎治療效果見表1。從表1可以看出，愛乳寶IgY抗體按相同劑量給藥1個(gè)療程后，治愈共124頭，總治愈率為76.5%，有效145頭，總有效率為89.5%。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析表明，不同程度的乳房炎對(duì)藥物療效有及其顯著的影響（p<0.01）。從實(shí)際治療情況來看，愛乳寶對(duì)輕度的臨床性乳房炎有較高的治愈和有效率，而對(duì)重度臨床性乳房炎治療效果略差。

 

 

表1 愛乳寶IgY抗體 對(duì)不同程度臨床乳房炎的治療效果

患病程度	處理頭數(shù)	治愈頭數(shù)	好轉(zhuǎn)頭數(shù)	無效頭數(shù)	治愈率%	有效率%
輕度 重度 合計(jì)	106 56 162	84 40 124	16 5 21	7 10 17	79.2 71.4 76.5	94.3 80.3 89.5

3. 愛乳寶IgY抗體對(duì)奶牛隱性乳房炎的治療效果，愛乳寶IgY抗體對(duì)隱性乳房炎的治療效果見表2。從表2可以看出，愛乳寶IgY抗體按相同劑量1個(gè)療程3次給藥后，陽性牛只頭數(shù)由給藥前的258頭降低到給藥后的31頭，頭轉(zhuǎn)陰率為87.9%；陽性乳區(qū)數(shù)有846個(gè)降低到78個(gè)，乳區(qū)轉(zhuǎn)陰率為90.7%。愛乳寶IGY抗體乳房局部給藥對(duì)隱性乳房炎具有顯著的治療效果。

表2愛乳寶IgY抗體對(duì)隱性乳房炎的治療效果

陽性頭數(shù)	乳區(qū)總數(shù)	轉(zhuǎn)陰頭數(shù)	轉(zhuǎn)陰乳區(qū)數(shù)	頭轉(zhuǎn)陰率%	乳區(qū)轉(zhuǎn)陰率%
86 86 86 合計(jì)：258	271 283 292 846	76 75 76 227	246 259 263 768	88.4 87.2 88.4 87.9	90.7 91.5 90.1 90.7

4.1  目前對(duì)乳房炎的治療多采用抗生素等化學(xué)藥物乳房內(nèi)灌注，雖然可達(dá)到殺菌，消除病原的目的，卻起不到乳房損傷的恢復(fù)作用，治療后患病乳區(qū)產(chǎn)量明顯下降。同時(shí)抗生素等抗菌藥物成分單一，細(xì)菌易產(chǎn)生耐藥性并存在藥物殘留和抗生素奶的弊端，而抗體可以直接黏附于病原菌的細(xì)胞壁上，改變病原菌細(xì)胞的完整性，干擾細(xì)菌代謝從而致細(xì)菌死亡^[4,5]。特異性IgY抗體能定向殺滅引起乳房炎的無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等；特別是還能有效殺滅抗生素對(duì)其無能為力的支原體以及L-型耐藥變種菌和其它耐藥菌。由于這種特異性IgY抗體只殺滅病原體，對(duì)牛乳房內(nèi)的乳酸桿菌等有益菌卻秋毫無犯[6]。更重要的是，使用這種特異性IgY抗體有助于恢復(fù)有益菌良好的生長微環(huán)境，構(gòu)建有益菌群，從而形成乳房炎致病菌無法再生存的新的菌群生態(tài)平衡，達(dá)到牛乳房炎不再復(fù)發(fā)的效果。

4.2  采用愛乳寶1個(gè)療程3次乳房局部給藥，對(duì)輕度臨床性乳房炎的治愈率和有效率高，對(duì)重度乳房炎效果略差，分析其原因與乳房炎患牛發(fā)病時(shí)間長或是多次復(fù)發(fā)的，腺體組織炎性損傷嚴(yán)重，恢復(fù)慢有直接的關(guān)系。因此，在生產(chǎn)實(shí)際中應(yīng)及早對(duì)發(fā)病牛進(jìn)行治療，對(duì)嚴(yán)重的病例應(yīng)適當(dāng)增加給藥劑量和療程，以提高治療效果。