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生乳中AFM₁的來源及防控措施

李清¹ ,黃艾祥²,毛華明¹, 劉木梁³, 顧招兵¹,蘇科巧²,王國(guó)芬⁴

(1.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，云南昆明 650201；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，云南昆明 650201；3.云南省大理州彌渡縣畜牧站，云南大理 675600 ; 4.昆明田園飼料有限公司，云南昆明 650201；）

摘要：針對(duì)牛奶中黃曲霉毒素的嚴(yán)峻形勢(shì)，對(duì)某地主要生乳基地的426個(gè)飼料中AFB₁及54個(gè)生乳中AFM₁的來源、檢測(cè)方法及脫毒劑的使用等進(jìn)行研究。研究結(jié)果顯示，玉米及以玉米為原料生產(chǎn)的產(chǎn)品受污染較嚴(yán)重，分別超標(biāo)2.4及2.6倍；奶牛攝入AFB₁的量與奶中AFM₁呈正相關(guān)；玉米中不同AFB₁含量添加不同水平脫霉劑后在不同飼養(yǎng)環(huán)境下與牛奶中AFM₁的轉(zhuǎn)化率為0.00%-2.32%，飼養(yǎng)環(huán)境差會(huì)加劇AFM₁的毒性。霉變玉米是乳中AFM₁的主要來源，防控應(yīng)主要從源頭抓起。

關(guān)鍵詞：生乳；AFM₁；來源；防控

The source and control measures of AFM₁ in raw milk

LIQing¹, HUANGAiXiang², MAOHuaMing¹, LIUMuLiang³, GUZhaoBing ¹, SUKeQiao², WANGGuoFen²

(1.College of animal science and technology of agricultural university Yunnan,kunming,650201；2. College of food science and technology of agricultural university Yunnan,kunming,650201；3. Animal Husbandry Station of Midu County Yunnan,Dali, 675600 ;4. Tianyuan Feed Co.Ltd. of Kunming Yunnan,kunming,650201)

Abstract: Face to the serious situation of aflatoxin in raw milk. Researched of sources and the detection method of AFB₁ and AFM₁ in 426 feeds and 54 raw milks in the main cow dairy breeding base of yunnan. The results show that corn aflatoxin contamination is more serious,and it exceed the standard 2.4-2.6 times; AFB₁is positively with AFM₁;The conversion rate is 0.00%-2.32%;The bad environment will exacerbate the toxicity of AFM₁.We formulate a viable, effective control and regulatory measures to control the safety of dairy products and ensure the health of consumers.

Keyword：Raw milk; AFM₁ ;Source; Control and measures

黃曲霉毒素M₁（AFM₁）是由牛、羊等哺乳類動(dòng)物食用了被黃曲霉毒素B₁（AFB₁）污染的飼料后，在體內(nèi)經(jīng)過羥基化產(chǎn)生的主要代謝產(chǎn)物^[1]。1993年黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機(jī)構(gòu)劃定為Ⅰ類致癌物，是一種毒性極強(qiáng)的劇毒物質(zhì)，而AFB₁的毒性與致癌性又最大，其毒性為氰化鉀的10倍、砒霜的68倍^[2]。

在自然條件下，黃曲霉毒素具有很強(qiáng)的穩(wěn)定性,高壓0.103MPa(120℃)處理4h毒性僅降解一半^[3]。牛奶中黃曲霉毒素超標(biāo)，不僅危害動(dòng)物健康，而且還會(huì)危及消費(fèi)者的身體健康。因此為了保障乳品質(zhì)量安全，對(duì)主要生乳基地飼料中的AFB₁及生乳中的AFM₁的來源、檢測(cè)方法及脫毒劑的使用等進(jìn)行研究，并制定了可行、有效地控制及監(jiān)管措施，以保障乳品安全，保證消費(fèi)者的身體健康。

針對(duì)飼料中AFB₁研究報(bào)道，奶牛飼料中以玉米及玉米為原料生產(chǎn)的產(chǎn)品及豆渣等霉變情況較嚴(yán)重。因此控制飼料霉變是減少牛奶黃曲霉毒素污染的重要途徑。脫霉劑主要用于霉化的飼料原料的脫毒處理。通過破壞或與毒物結(jié)合生成難溶性物質(zhì)達(dá)到脫毒的目的。但是，脫霉劑使用不當(dāng)往往產(chǎn)生負(fù)面影響^[9]。實(shí)驗(yàn)根據(jù)飼料中AFB₁的主要來源對(duì)玉米中添加不同劑量脫霉劑后在不同飼養(yǎng)環(huán)境下對(duì)牛奶中AFM₁含量進(jìn)行比較，為合理制定防控措施提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1對(duì)主要生乳基地飼料中的AFB₁及生乳中的AFM₁的研究

據(jù)GB/T14699.1-2005 飼料采樣法^[4]，采取紅河、德宏、大理、玉溪及昆明地區(qū)等我省主要生乳基地的426個(gè)飼料樣本，以GB/T 17480-2008飼料中黃曲霉毒素B₁的測(cè)定法為依據(jù)^[5]，對(duì)飼料樣本中AFB₁分析研究。

1.2 飼料及生鮮乳中黃曲霉毒素的防控措施

在第Ⅰ種飼養(yǎng)環(huán)境的玉米（AFB₁=51.64ug/kg）及第Ⅱ種飼養(yǎng)環(huán)境的玉米（AFB₁=1.92ug/kg）中分別添加同種脫霉劑0.625%（A組）、0.825%（B組）、0.0%（C組），飼喂體重相近、健康的奶牛18頭，每組3頭，每天定量飼喂4kg實(shí)驗(yàn)玉米，按<農(nóng)業(yè)部生鮮乳質(zhì)量安全監(jiān)測(cè)工作規(guī)范>^[10]，采取實(shí)驗(yàn)期3天的54個(gè)生乳樣，以GB 5413.37-2010乳和乳制品中黃曲霉毒素M₁的測(cè)定法為依據(jù)^[11]，對(duì)生乳樣本中AFM₁分析研究。

2 結(jié)果與分析

2.1 426個(gè)不同飼料樣本中的AFB₁含量比較

表1 玉米類中AFB₁含量 (ug/kg)

AFB₁ 含量	玉米粒	玉米面	玉米桿	玉米桿堆			玉米皮顏色		玉米桿青貯
AFB₁ 含量	玉米粒	玉米面	玉米桿	葉及穗	苞葉	底部	深	淺	玉米桿青貯
≤10	14	8	9	10	10	10	8	8	10
10-30	3	1	1	0	0	0	2	2	0
≥50	2	1	0	0	0	0	0	0	0
最大值	55	120	18	＜0.5	＜0.5	＜0.5	17	20	0.57

表1顯示，玉米粒及玉米面中AFB₁超標(biāo)，最高超標(biāo)2.4倍，而玉米桿及青貯和玉米桿堆不同部位中的AFB₁含量均未超標(biāo)，并且不同品種的玉米AFB₁在允許范圍內(nèi)。據(jù)某測(cè)試中心數(shù)據(jù)顯示廣西送檢的玉米中AFB₁高達(dá)1000ug/kg。對(duì)樣品反向溯源表明導(dǎo)致玉米粒及玉米面中AFB₁超標(biāo)的主要原因是收割不及時(shí)、貯存和運(yùn)輸不當(dāng)造成，尤其在霉雨季節(jié)較為突出。

表2 不同原料制備的酒糟中AFB₁含量 (ug/kg)

AFB₁ 含量	酒糟			酒糟粉
	玉米粒玉米芯高粱小麥大麥
≤10 9 10 10-30 0 0 ≥50 1 0 最大值 131 6.5		10 0 0 1.4	10 10 8 0 0 2 0 0 0 6.8 <0.5 17

表2顯示，以玉米粒為原料的酒糟中AFB₁超標(biāo)，超標(biāo)2.6倍，其原因之一是制備的原料玉米粒中的AFB₁超標(biāo)，其二是儲(chǔ)存條件不當(dāng)及時(shí)間過長(zhǎng)導(dǎo)致。

表3 不同部位不同儲(chǔ)存時(shí)間稻草中AFB₁含量 (ug/kg)

AFB₁ 含量	稻草堆								當(dāng)年稻草（袋中）
	當(dāng)年		一年		當(dāng)年			一年
	內(nèi)	外	內(nèi)	外	上部	中部	底部	底部
≤10	10	10	10	10	10	10	10	10	10
10-30	0	0	0	0	0	0	0	0	0
≥50	0	0	0	0	0	0	0	0	0
最大值	1.5	0.7	1.5	1.5	1.7	0.8	0.5	0.9	8

表3顯示，不同部位不同儲(chǔ)存時(shí)間稻草中AFB₁含量均低于10ppb。據(jù)研究稻草中的雜色曲霉菌素（ST）在動(dòng)物體內(nèi)會(huì)轉(zhuǎn)化為AFB₁^[6]，因此飼喂檢出AFB₁但含量未超標(biāo)的稻草時(shí)，需充分考慮ST的轉(zhuǎn)化。同一稻草同儲(chǔ)存條件儲(chǔ)存時(shí)間不同其含量不同，時(shí)間越長(zhǎng)，其含量略高，但差異不顯著，而受儲(chǔ)存條件影響較為明顯，袋中AFB₁達(dá)8ppb，與通風(fēng)涼曬下的結(jié)果相比差異極顯著。

表4 不同飼料及原料中AFB₁含量 (ug/kg)

樣名	AFB₁含量
樣名	≤10	10-30	≥50	最大值
菜葉	10	0	0	1.6
豆桿糠	10	0	0	8.9
精補(bǔ)料	20	0	0	9.2
預(yù)混合料	10	0	0	<0.5
苜蓿	10	0	0	6.9
麥麩	15	0	0	3.1
小麥	10	0	0	0.9
檸檬渣	10	0	0	0.8
米糠	10	0	0	1.7
菜籽粕	10	0	0	9.7
棉籽粕	10	0	0	2.2
豆粕	10	0	0	<0.5
玉米蛋白粉	10	0	0	3.2
DDGS	9	1	1	18
噴漿纖維	9	1	1	15
豆渣	9	1	0	20.8

表4看出，菜葉、苜蓿、麥麩、米糠、菜籽餅、棉籽餅、豆粕、精料補(bǔ)充料、預(yù)混合料、豆（桿）糠、檸檬渣、玉米蛋白粉中AFB₁均低于10ppb；DDGS和噴漿纖維中AFB₁含量略高，但低于限量，可能與二者均為玉米副產(chǎn)物及加工工藝有關(guān)；豆渣中AFB₁含量相對(duì)較高，達(dá)20.8 ppb，溯源表明貯藏及使用不當(dāng)。

2.3生乳中AFM₁的防控

應(yīng)用脫霉劑進(jìn)行奶牛飼喂實(shí)驗(yàn)，測(cè)定乳中AFM₁的變化，結(jié)果見表5、表6。

表5 玉米中添加不同劑量脫霉劑后Ⅰ環(huán)境中牛奶AFM₁含量 (ppb)

Ⅰ	A組		B組		C組
	牛奶中AFM₁含量
第一天	A1	0.081	B1	---	C1	0.520
	A2	---	B2	0.125	C2	0.039
	A3	1.103	B3	---	C3	1.196
合計(jì)	1.184		0.125		1.775
第二天	A1	---	B1	0.022	C1	0.563
	A2	0.210	B2	---	C2	---
	A3	0.532	B3	---	C3	0.987
合計(jì)	0.743		0.022		1.550
第三天	A1	---	B1	---	C1	0.613
	A2	0.135	B2	---	C2	0.029
	A3	0.231	B3	---	C3	1.02
合計(jì)	0.366		---		1.662

表6 玉米中添加不同劑量脫霉劑后Ⅱ環(huán)境中牛奶AFM₁含量 (ppb)

Ⅱ	A組		B組		C組
牛奶中AFM₁含量
第一天	D1	---	E1	0.004	F1	0.026
	D2	0.033	E2	---	F2	0.034
	D3	---	E3	---	F3	---
合計(jì)	0.033		0.004		0.06
第二天	D1	---	E1	---	F1	---
	D2	0.009	E2	---	F2	0.032
	D3	---	E3	---	F3	---
合計(jì)	0.009		---		0.032
第三天	D1	---	E1	---	F1	0.019
	D2	---	E2	---	F2	0.031
	D3	0.007	E3	---	F3	---
合計(jì)	0.007		---		0.050

表5、6結(jié)果顯示，54個(gè)生鮮乳樣本，檢出25個(gè)，29個(gè)未檢出，檢出率為46.3%，其中

AFM₁≥0.5ppb有8個(gè)，超標(biāo)率占總檢樣數(shù)14.8%，合格率達(dá)85.2%；在AFB₁超標(biāo)的玉米

中添加脫霉劑時(shí)，試驗(yàn)期的第三天A組牛奶中的AFM₁≤0.5ppb，而B組在試驗(yàn)期的第一天牛奶中的AFM₁即小于0.5ppb；攝入AFB₁的量與牛奶中排出的AFM₁呈正相關(guān)；第Ⅰ種飼養(yǎng)環(huán)境下玉米中AFB₁與牛奶中AFM₁的轉(zhuǎn)化率A、B、C三組分別為0.48%-2.14%、0.04%-0.24%、1.91%-2.32%，第Ⅱ種飼養(yǎng)環(huán)境下玉米中AFB₁與牛奶中AFM₁的轉(zhuǎn)化率A、B、C三組分別為，0.36%-1.71%、0.00%-0.21%、1.61%-1.77%，而添加量為0.825%的B組的轉(zhuǎn)化率最低，而不同的飼養(yǎng)環(huán)境其轉(zhuǎn)化率又不盡相同，這可能是飼養(yǎng)環(huán)境差會(huì)加劇AFM₁的毒性^[12]。

3.小結(jié)

對(duì)426個(gè)不同飼料樣本中的AFB₁分析結(jié)果表明，奶牛食用的飼料中含有過量AFB₁是生乳中AFM₁的主要來源。玉米及以玉米為原料制備的青貯和酒糟、豆渣受污染較嚴(yán)重。結(jié)合同期我省主要生乳企業(yè)對(duì)生乳中的AFM₁檢測(cè)結(jié)果表明，如果使用霉化的玉米、青貯料、酒糟、豆渣及霉變的飼草飼喂奶牛，加之污染的黃曲霉毒毒與其它霉菌毒素發(fā)生協(xié)同效應(yīng)，則加劇了黃曲霉毒素的毒性^[2]，并使部分AFB₁在奶牛體內(nèi)轉(zhuǎn)化成AFM₁，從而導(dǎo)致其生產(chǎn)加工的乳制品中出現(xiàn)AFM₁超標(biāo)。

脫霉劑并非萬能，研究表明在高含量AFB₁的飼料中添加脫霉劑時(shí)，使用時(shí)間和劑量不正確及脫霉劑在飼料中的混合均勻度未達(dá)到要求，同樣會(huì)導(dǎo)致牛奶中的AFM₁超標(biāo)；攝入AFB₁的量與牛奶中排出的AFM₁呈正相關(guān)；飼養(yǎng)環(huán)境差可能會(huì)加劇AFM₁的毒性。

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課題來源：云南省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系乳品加工質(zhì)量安全實(shí)驗(yàn)室

第一作者：李清（1971-）,女,廣東臺(tái)山人,高級(jí)實(shí)驗(yàn)師,碩士；主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)教學(xué)、科研及質(zhì)量檢測(cè)工作。聯(lián)系方式:15368014556, E-mail:814318012@qq.com

通訊作者：毛華明（1963-),男,教授,博士；主要從事動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)教學(xué)、科研工作

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